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兔体内三唑及其代谢物检测(二)
春水堂生物科技公司所售产品全部经过我们反复测试与老客户实战有 / 2011-10-28

2 检测三唑仑的实验方法
2.1 试剂与仪器
甲醇、乙醇、正己烷、甲苯、乙醚、氯仿、异丙醇、无水碳酸钠、β-葡萄糖酸苷酶(活度400万/g);标准溶液T、HT(购于康林公司);三唑仑药片(江苏徐州第三制药厂生产);美国VarianGC(3800)/MS(Saturn2000);VA25ms,30m×0.25mm石英毛细管柱;兔固定箱、注射器、镊子、酒精棉球及干棉球、天平、秤、开口器、导尿管、刻度试管、吸管、漏斗、pH试纸、三角烧瓶、蒸馏水、分液漏斗;
2.3 检测三唑仑的缓冲液及标准品的配制
pH=4.8乙酸缓冲液:1.6g乙酸钠+1.2ml冰乙酸至100ml;
pH=8.8碳酸钠缓冲液:碳酸氢钠4.2g+无水碳酸钠5.3g加水至50ml;
pH=10.8碳酸钠缓冲液:1.0M碳酸钠溶液+1.0M碳酸氢钠溶液(3∶1);
pH=8.7的固体缓冲物碳酸钠2碳酸氢钠(1∶8);β-葡萄糖酸苷酶:用时用pH=6.8磷酸二氢钠缓冲液新配成8000单位/ml的水溶液;标准品配成1mg/ml的储备。
2.4 动物实验
家兔(4.2kg)灌三唑仑2片,约0.5mg,12:00时灌服,12:15有反应,后无嗜睡症状。于第二日11:00时灌药4片,反应不明显,12:00灌药8片,反应明显。14:30提取心血、尿液、肝、胃。
家兔(2.6kg)灌三唑仑药10片,约2.5mg,2h后,提取兔血、尿、脏器各2g,配2ml置于10ml离心管中。
两只兔子灌服不同剂量的三唑仑,是为了检验其对此药物的耐受性。

 

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